Cuscuta campestris tedavisi ile mide kanseri hücrelerinde apoptozun indüklenmesi ve reaktif oksijen türlerinin oluşumu yoluyla proliferasyonun engellenmesi

Abstract

Amaç: Kanser tahrip edici, ölümcül bir hastalıktır ve dünya çapındaki ölüm nedenleri arasında ikinci sırada yer almaktadır. Mide kanseri gibi kanser türleri için farklı tedavi yöntemleri mevcut olsa da çoğu tedavi yöntemleri birçok yan etkiye sahiptir. Çeşitli iyileştirici özelliklere sahip Cuscuta campestris' in kanser hücreleri üzerindeki etkilerinin araştırılması yeni bir alandır ve etkileri tam olarak çalışılmamış ve aydınlatılmamıştır. Bu çalışmada, C. campestris özütünün farklı konsantrasyonlarının mide kanseri hücreleri üzerindeki sitotoksik, genotoksik, apoptotik ve reaktif oksijen türlerinin üretimindeki etkilerini araştırdık. Gereç ve yöntem: Araştırmamızda, C. campestris için antioksidan, pro-oksidan ve radikal temizleyici aktiviteleri değerlendirildi ve miktar tayini LC-MS / MS yöntemi ile analiz edildi. C. Campestris’ in normal hücrelere kıyasla mide kanseri (AGC) hücreleri üzerindeki seçiciliğini göstermek için insan normal deri fibroblastik (CCD-1079Sk) hücre hattı kullanıldı. Apoptoz belirteçlerinin tayininde akridin oranj / etidyum bromür çift boyama, akış sitometrisi ve western blot metotlarından faydalanıldı. Genotoksik aktivite tayini, Comet analizi ile gerçekleştirildi. Bulgular: Sonuçlarımız, C. Campestris etanolik özütünün doza bağlı bir şekilde, mide kanseri hücre hattı üzerinde normal hücrelere kıyasla önemli ölçüde daha yüksek sitotoksik etkilere sahip olduğunu göstermiştir. Ayrıca, elde ettiğimiz veriler C. campestris'in mide kanseri hücre hatlarında reaktif oksijen türlerinin oluşumunu arttırdığını ve DNA hasarına neden olduğunu açıkça göstermiştir. Yapılan apoptoz tayin ölçümleri C. campestris' in bölünmüş kaspaz-3, bölünmüş kaspaz-9, bölünmüş PARP ve P-53'ü aktive etmesiyle kanser hücreleri üzerinde apoptotik bir etkiye sahip olduğunu da doğrulamıştır. Sonuç: Bu çalışmanın sonucu olarak, C. Campestris’in mide karsinomu tedavisinde umut vadeden bir antikanser ajanı olabileceği düşünülmektedir.

Cancer is a destructive disease and second most common cause of death worldwide. Although there are different therapeutic methods for cancers such as gastric cancer, most of them possess many adverse effects. Investigating the effects of Cuscuta campestris, which has various medicinal properties, on cancer cells is a new field and has not been fully elucidated. In this study, we investigated the effects of cytotoxic, genotoxic, apoptotic and reactive oxygen species production on gastric cancer cells with various concentrations of C. campestris extract.MATERIAL AND METHOD: Content analysis of C. campestris was measured by LC-MS/MS method. Selectivity on gastric cancer cell line (AGC cell line) was compared to normal cells, human normal skin fibroblastic cells (CCD-1079Sk) for all experiments. Antioxidant, pro-oxidant and radical scavenging activities were evaluated, and apoptosis indicators were measured via acridine orange/ ethidium bromide double staining, flow cytometer and western blotting assays. Genotoxic activity assay was carried out by using Comet assay. RESULTS: Our results demonstrated that ethanolic extract of C. campestris has significantly higher cytotoxic effects on gastric cancer cell line than normal cells in a dose dependent manner. We also observed that C. campestris increased the generation of reactive oxygen species in gastric cancer cell lines and caused DNA damage. Apoptosis detection assays further confirmed that C. campestris has an apoptotic effect by activated of cleaved caspase-3, cleaved caspase-9, cleaved PARP and P-53. CONCLUSION: Hence, C. campestris might represent a promising anticancer agent for gastric carcinoma treatment.